拜万戈、瑞戈非尼拮抗BCRP介导的结肠癌多药耐药

2022年10月20日13:16:05拜万戈、瑞戈非尼拮抗BCRP介导的结肠癌多药耐药已关闭评论

乳腺癌耐受药物蛋白 (BCRP) 的过度表达已被证明会在结肠癌中产生多药耐受药物性 (MDR),导致化学疗法的主要障碍。在这项研究中,我们评估拜万戈/瑞戈非尼,口服多激酶抑制剂的效果,在抑制BCRP介导的MDR在硅片,在体外和体内.我们发现瑞戈非尼通过延长细胞内积累使 MDR 结肠癌细胞对 BCRP 底物显着敏感。暴露于瑞戈非尼的细胞中 BCRP 的表达水平或亚细胞分布没有显着变化。机制研究表明,瑞戈非尼可刺激 BCRP ATPase 活性。我们的诱导拟合对接和分子动力学模拟表明,瑞戈非尼与人结晶 BCRP 的跨膜结构域之间存在强而稳定的互相作用。体内肿瘤异种移植研究表明,瑞戈非尼和拓扑替康的组合对米托蒽醌耐受药物的 S1-M1-80 异种移植肿瘤具有协同作用。总之,我们的研究表明,瑞戈非尼将有助于对抗结肠癌的 MDR。

拜万戈、瑞戈非尼拮抗BCRP介导的结肠癌多药耐药

在本研究中,我们验证了拜万戈/瑞戈非尼对 MDR 结直肠癌的致敏作用,这可能有助于为结直肠癌患病者开发更有效的靶向联合化学疗法。拜万戈/瑞戈非尼目前作为 FDA 批准的靶向医治用于医治结直肠癌;因此,使用瑞戈非尼开发新型联合治疗方法具有临床转化优势。

拜万戈、瑞戈非尼拮抗BCRP介导的结肠癌多药耐药

在我们的细胞毒性试验中,拜万戈/瑞戈非尼对 S1-M1-80 细胞的致敏作用明显与 BCRP 相关,正如我们的实验设计所证明的,原理如下。首先,瑞戈非尼对同基因亲代 S1 细胞没有显着敏感性,其中 BCRP 没有过表达。其次,顺铂不是 BCRP 的底物,正如亲本 S1 和 MDR S1–M1–80 细胞中顺铂 IC50值的相似性所证明的那样。瑞戈非尼并未使这两种细胞对顺铂敏感,这表明拜万戈/瑞戈非尼的致敏作用仅限于这些细胞中的 BCRP 底物。最后,BCRP 转染的 HEK/ABCG2 细胞表现出对 BCRP 底物的抗性,而这种抗性能够被瑞戈非尼逆转。因此,我们能够得出结论,瑞戈非尼通过靶向 BCRP 转运蛋白使 S1-M1-80 细胞中的 MDR 敏感。

拜万戈、瑞戈非尼拮抗BCRP介导的结肠癌多药耐药

抑制活性外排泵如 BCRP 会导致底物外排降低,从而延长细胞内底物积累,最终导致药效延长。我们的药品流出分析显示S1–M1–80 细胞中的[3H]-米托蒽醌快速流出,表明这些细胞中的 BCRP 功能活跃。瑞戈非尼对 BCRP 泵的抑制导致药品流出显着降低。降低的药品流出并不能保证细胞内药品积累,尤其是在癌细胞中,因为细胞内药品可能会因代谢途径改变而失活。因此,Hoechst 染料和 [3H]-米托蒽醌用于直接定性和定量显示细胞内药品积累。这些结果表明,瑞戈非尼致敏 MDR 的机制是通过瑞戈非尼抑制 BCRP 的外流和延长细胞内药品积累最终导致细胞去世。

作为一种膜结合转运蛋白,BCRP 也可能通过下调或转移扩散到细胞质中而失去其功能。由于瑞戈非尼预处置 1 小时在我们的外排/蓄积试验中表现出足够的抑制作用,因此抑制作用不太可能主要与下调有关。通过蛋白质印迹分析进一步检验了该假设。在用拜万戈/瑞戈非尼处置细胞长达 72 小时后,未观察到 BCRP 的明显下调。因此,瑞戈非尼没有起到 BCRP 下调剂的作用。另一个潜在要素是 BCRP 的易位。与下调不同,膜转运蛋白的易位能够在几毫秒内发生,但是我们的免疫荧光分析没有显示 BCRP 易位。考虑到所有这些结果,我们得出结论,瑞戈非尼可能直接靶向 BCRP 并抑制其底物泵送功能。

总之,我们报告说,拜万戈/瑞戈非尼通过与 BCRP 的跨膜腔结合、抑制外排功能和延长 BCRP 底物的细胞内浓度来逆转结直肠癌细胞系中 BCRP 介导的 MDR。体内研究表明,拓扑替康和瑞戈非尼的联合医治对抑制 MDR 人类结直肠异种移植瘤的发展具有协同作用。这些结果表明,拜万戈/瑞戈非尼作为与常规化学疗法药品的联合医治具有很大的潜力。患有结直肠癌或转移扩散性肝癌的患病者,尤其是那些 BCRP 过度表达的恶性肿瘤患病者,可能会受益于瑞戈非尼联合化学疗法。【微信:yaodaoyaofang】扫描下方二维码了解更多:

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